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高效液相色谱图固相萃取(高效液相色谱法固相萃取检测饮料中纽甜)

纽甜也叫尼尔甜,化学名称N-[N-(3,3一二甲基丁基)-L-α-天冬氨酰]-L-苯丙氨酸-1-甲酯,是一种功能性甜味剂,甜度达到我们熟知蔗糖的2000倍,产品的价格相对低廉,质量稳定,目在饮料零食等都有所使用。微源实验室查阅文献资料后,实验了一种适用于检测机构的纽甜检验方法。

精确称取纽甜标准0.1 g,配制成1 mg/mL的纽甜标准储备液,于冰箱保存;取非果肉类沉淀饮料10g左右,先用3mL甲醇,4mL水活化平衡固相萃取柱,将提取液上样,用10mL水和2mL50%的甲醇溶液依次淋洗去除杂质,最后用甲醇:三氟乙酸溶液(100:0.015)洗脱,收集洗脱液2mL,混匀后进样;将标准液用超纯水稀释成浓度分别为5μg/mL,10μg/mL,20μg/mL,标准溶液。

色谱柱


(资料图片仅供参考)

CAPCELLPAKC18(4.6mmX250mm,5μm);

流动相

乙腈:0.015%三氟乙酸溶液=30:70(v/v)

流速

1.0mL/min:

柱温

30℃

检测波长

210nm

进样体积

20μL

在上述色谱条件下进行HPLC测定,得到饮品的色谱图。纽甜浓度在0.5μg/mL-50μg/mL范围内作标准曲线图。

平行测定50μg/mL纽甜标准溶液6次,相对标准偏差为1.6%。在流动相为等度的实验条件下,纽甜的保留时间大约在13 min,谱图峰形尖锐选择性好,和其他常用甜味剂和防腐剂实现了较好的分离。线性关系良好,当定容体积为2mL,进样20μL时,方法的检出限为0.05mg/kg。该方法满足实际检测需要,可以满足食品卫生监督检测工作。

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